Etude comparative de 2 techniques de diagnostic moléculaire de la toxoplasmose congénitale : PCR nichée et PCR quantitative en temps réel (Taq Man)

R. Bardi, I. Naouar, Ch. Kallala, H. Louzir, Y. Gorgi

La toxoplasmose congénitale résulte de la contamination fotale pergravidique par le toxoplasme. Fréquente et grave, elle justifie une surveillance particulière des femmes exposées. Pour pallier aux limites des testes sérologiques du diagnostic prénatale de la toxoplasmose congénitale de nouvelles techniques moléculaires ont été développées. Dans le but de comparer les résultats de la nested-PCR et la PCR en temps réel (TaqMan), 41 liquides amniotiques prélevés chez des femmes enceintes ayant présenté une séroconversion au cours de leurs grossesses, ont été analysés. Les deux techniques utilisées sont de type quantitatif et utilisent le même gène cible B1. Le seuil de détection a été réalisé en utilisant une gamme standard. Ce seuil est de 5 parasites pour la PCR nichée et de 0,2 pour la PCR quantitative en temps réel. Une concordance des 2 techniques a été retrouvée dans 22/41 prélèvements (51%), alors que 19/41 (49%) LA été PCR nichée (-) et PCR en temps réel (+). La question qui se pose dans ces derniers cas : s'agit-il d'authentiques toxoplasmoses congénétales ? La sensibilité élevée de la PCR quantitative en temps réel par rapport à la PCR nichée mérite d'être confirmée par un suivi clinico-biologique prospectif des 19 patientes afin de révéler soit les « faux négatifs » par la nested-PCR, soit les « faux positifs » par la PCR en temps réel, vu la différence de sensibilité du seuil de détection des deux techniques utilisées.