Détection des mutants pré-core (1896) du virus de l'hépatite B par PCR-RFLP

R. Ayari, H. Aouadi, T. Souayeh, H. Nefzi, S. Jendoubi-Ayed, T. Najjar, T. Ben Abdallah, K. Ayed, Y. Gorgi

Le virus de l'hépatite B (VHB) se caractérise par sa variabilité génétique et antigénique. Récemment, un grand nombre de mutations du génome viral B a été identifié. Bien que la majorité de ces mutations semble silencieuse et sans conséquences cliniques, certaines sont liées à une forme plus sévère de la maladie. Il s'agit, en particulier de la mutation ponctuelle G /A du nucléotide 1896 au niveau de la région pré-core (codon28), reportée chez plusieurs patients porteurs chroniques du VHB avec AgHBe négatif. Cette dernière, en induisant, un codon stop prématuré, inhibe la synthèse de l'AgHBe. Elle est associée à la persistance de la réplication virale B même après la séroconversion anti-HBe. Afin d'étudier la prévalence de la mutation 1896 en Tunisie, 60 sérums provenant de porteurs chroniques de l'AgHBs ont été amplifiés par nested PCR dans la région pré-core. Ces sérums ont été subdivisés en deux groupes : G1 constitué de 8 sérums AgHBe positifs et G2 composé de 52 sérums AgHBe négatifs. La PCR-RFLP de ces 60 amplicons, objective la présence de la mutation (1896) chez 52 patients (86.66%). Il s'agit de 32 (53.33%) patients infectés par la souche mutée isolée, 20 (33.33%) malades présentant une coinfection par les deux souches sauvage et mutée et seulement, 8 patients sont infectés par la souche sauvage (13.34%). L'étude analytique selon les groupes révèle que la fréquence de la mutation (1896) isolée et/ou associée à la souche sauvage est statistiquement plus prévalente chez les patients du G2 (90%) comparativement à celle chez les patients du G1 (62%) (p<0.05). En effet, dans le G1, la souche sauvage est retrouvée seule dans 3cas (37.5%). Elle est associée au variant pré-C dans 4 cas (50%) et un seul patient a une infection par la souche mutée (12.5%). Alors que dans le G2, le variant pré-C est retrouvé isolé dans 31cas (59.61%), associé à la souche sauvage dans 16 cas (30.77%) et seulement 5 cas (9.62%) sont infectés par la souche sauvage isolée. Ainsi, la présence isolée du mutant pré-C est statistiquement plus fréquente chez les patients AgHBe négatifs (59.75%) par rapport à celle retrouvée chez les porteurs AgHBe positif (12.5%) (p<0.01). La forte prévalence de la mutation 1896 dans notre population infectée par le VHB incite sa recherche systématique chez tout porteur chronique de l'AgHBs avec ou sans séroconversion HBe.